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bFGF在原代培养人皮肤成纤维细胞中的高效分泌表达
引用本文:孙奋勇,陈小佳,洪岸.bFGF在原代培养人皮肤成纤维细胞中的高效分泌表达[J].暨南大学学报,2004,25(6):668-674.
作者姓名:孙奋勇  陈小佳  洪岸
作者单位:暨南大学生物工程研究所,广东,广州,510632
基金项目:国家"863"资助项目(2002AA2Z344E)
摘    要:目的:提高碱性成纤维细胞生长因子在原代培养的成纤维细胞中的分泌表达。方法:bFGF缺乏典型的分泌信号肽,将鼠抗体轻链基因Igx的信号肽序列引入该基因的5′端得到新的IgK-bFGF重组体基因。同时考虑到人源细胞氨基酸编码密码子的偏好性,对整个基因序列密码子的第3位摇摆碱基作了偏好性调整,并克隆入真核表达载体中。得到的重组质粒用酶切的方法线性化,尽量去除质粒载体上大肠杆菌起源的基因序列,然后通过电穿孔的方法将线性质粒转导入原代培养的人皮肤成纤维细胞。结果:与野生型的bFGF基因相比,嵌合体bFGF被大量分泌到培养基中,同时对于成纤维细胞的增殖有明显的促进作用。结论:这种嵌合体基因的构建可以明显提高成纤维细胞对bFGF。的分泌表达。

关 键 词:碱性成纤维细胞生长因子  成纤维细胞  信号肽
文章编号:1000-9965(2004)06-0668-07
修稿时间:2004年6月30日

High-level secretory expression of bFGF in primarily cultured human skin fibroblast
SUN Fen-yong,CHEN Xiao-jia,HONG An.High-level secretory expression of bFGF in primarily cultured human skin fibroblast[J].Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition),2004,25(6):668-674.
Authors:SUN Fen-yong  CHEN Xiao-jia  HONG An
Abstract:
Keywords:basic fibroblast growth factor  fibroblast  signal peptide
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