金藻富含半胱氨酸蛋白质CRP1的重组表达和功能分析

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是动物、植物和微生物中广泛存在的一种小分子蛋白,富含半胱氨酸,具有维持细胞代谢中金属离子稳态和应激条件下重金属离子解毒的功能。文章从金藻Poterioochromonas malhamensis中鉴定了一种新的PmCRP1基因。该基因全长396bp,无内含子,编码131个氨基酸,富含26个半胱氨酸。PmCRP1蛋白的半胱氨酸残基主要排列形式有CCC,CXCC,XCCX,CXC,XXCXX(C是Cys;X是Cys以外的任何氨基酸残基)。这种保守的半胱氨酸排列形式,与金属硫蛋白类似。实时荧光定量分析表明Cd2+,Cu2+,Zn2+,Pb2+,Hg2+离子未能诱导PmCRP1基因表达上调。构建重组质粒pSUMO-PmCRP1并转化大肠杆菌BL21,获得PmCRP1的重组表达。大肠杆菌BL21/pSUMO-PmCRP1对Cd2+,Cu2+,Zn2+耐受性提高。表明PmCRP1具有螯合重金属离子能力,可能是一种新的金属硫蛋白,可用于环境中重金属离子的生物去除。