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茂原链霉菌谷氨酰胺转胺酶基因克隆、序列分析及原核表达
引用本文:张智俊,罗淑萍,田兴军,李亚玲,杨昌林. 茂原链霉菌谷氨酰胺转胺酶基因克隆、序列分析及原核表达[J]. 南京大学学报(自然科学版), 2006, 42(1): 88-95
作者姓名:张智俊  罗淑萍  田兴军  李亚玲  杨昌林
作者单位:南京大学生命科学院 南京210093(张智俊,田兴军,杨昌林),新疆农业大学分子生物学重点实验室 乌鲁木齐830052(罗淑萍),东胜创新生物科技有限公司 南京210090(李亚玲)
基金项目:中国科学院资助项目;中国博士后科学基金;高等学校博士学科点专项科研项目
摘    要:以茂原链霉菌(Streptomyces m obaraensis)的基因组DNA为模板,利用PCR的方法扩增出谷氨酰胺转胺酶(Transglutam inase,TGase)的完整基因片段.序列分析结果表明,该片段全长1 246 bp,包含一个完整的ORF,长度1 146 bp,编码395 aa,分子量为44 kD左右.该基因的核酸序列及推导的氨基酸序列同已知微生物来源的若干TGase相比,序列相似性均很高,并且发现与酶催化活性有关的一些motif,如酰胺化位点等;在此基础上,又进一步对其二级结构进行分析并完成了TGase三维结构的建模.将编码TGase酶的基因片段插入到原核表达载体pQE30Xa中,并转化大肠杆菌(E.coliJM109).SDS-PAGE结果表明,经IPTG诱导后该基因得到表达,表达产物的酶活为2.2 U/mL.

关 键 词:茂原链霉菌  谷氨酰胺转胺酶  基因克隆  序列分析  表达
收稿时间:2004-12-11

Cloning, Sequence Analysis and Expression of Transglutaminase Gene from Streptomyces mobaraensis
Zhang Zhi-Jun,Luo Shu-Ping,Tian Xing-Jun,Li Ya-Ling,Yang Chang-Lin. Cloning, Sequence Analysis and Expression of Transglutaminase Gene from Streptomyces mobaraensis[J]. Journal of Nanjing University: Nat Sci Ed, 2006, 42(1): 88-95
Authors:Zhang Zhi-Jun  Luo Shu-Ping  Tian Xing-Jun  Li Ya-Ling  Yang Chang-Lin
Affiliation:1. School of Life Science, Nanjing University, Nanjing,210093, China ; 2. Key Laboratory of Molecular Biology, Xinjiang Agricultural University, Urumq,830052, China; 3, EASTWIN Bio-tech Co., Ltd., Nanjing,210090,China
Abstract:
Keywords:Streptomyces moboransis  transglutaminase  gene cloning  sequence analysis  expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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