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hBSP与GFP非融合表达载体的构建及乳腺癌细胞转染条件优化
引用本文:杜红延,王捷,郭勇,郑霖,杨静,刘大志.hBSP与GFP非融合表达载体的构建及乳腺癌细胞转染条件优化[J].华南理工大学学报(自然科学版),2005,33(11):46-50.
作者姓名:杜红延  王捷  郭勇  郑霖  杨静  刘大志
作者单位:华南理工大学生物科学与工程学院,广东,广州,510640;广州军区广州总医院医学实验中心,广东,广州,510010
基金项目:广东省自然科学基金资助项目(04003534);广东省医学科研基金资助项目(A2002536)
摘    要:为进一步研究骨唾液蛋白(BSP)在乳腺癌细胞骨转移的整个过程中的作用,首先要建立稳定高效表达BSP的乳腺癌细胞系.文中首先从构建好的pB-hBSP载体中亚克隆hbsp基因,构建重组质粒pIRES2-hBSP-EGFP,然后利用脂质体介导转染特异性骨转移的乳腺癌细胞MDA-MB-231BO,优化一系列转染条件以提高转染效率,再利用G418和流式细胞仪筛选获得稳定转染细胞.结果发现:在96孔板中,细胞融合度达到90%;用1μg脂质体介导280 ng重组质粒转染10 h,转染效率最高可达(19.70±1.10)%.

关 键 词:骨唾液蛋白  荧光蛋白  重组表达载体  乳腺癌细胞  转染  优化
文章编号:1000-565X(2005)11-0046-05
收稿时间:2005-01-17
修稿时间:2005年1月17日

Construction of hBSP Eukaryon Expression Vector Carrying GFP and Optimization of Transfection Conditions for Breast Cancer Cells
Du Hong-yan,Wang Jie,Guo Yong,Zheng Lin,Yang Jing,Liu Da-zhi.Construction of hBSP Eukaryon Expression Vector Carrying GFP and Optimization of Transfection Conditions for Breast Cancer Cells[J].Journal of South China University of Technology(Natural Science Edition),2005,33(11):46-50.
Authors:Du Hong-yan  Wang Jie  Guo Yong  Zheng Lin  Yang Jing  Liu Da-zhi
Institution:Du Hong-yan~1 Wang Jie~2 Guo Yong~1 Zheng Lin~2 Yang Jing~2 Liu Da-zhi~2
Abstract:
Keywords:bone sialoprotein  fluorescent protein  recombinant expression vector  breast cancer cell  transfection  optimization
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