猕猴不同组织器官中黄嘌呤脱氢酶 /氧化酶基因的mＲNA 表达的半定量 ＲT - PCＲ 检测方法的建立

摘要: 目的 建立半定量 ＲT-PCＲ 检测方法检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织，肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶( XDH /XO) 的 mＲNA 的表达。方法 分别提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织，肾脏组织中总 ＲNA，用 ＲT-PCＲ 二步法进行 XDH /XO 基因片段扩增，内参基因选用管家基因 GAPDH，对获得的目的片段进行序列测定以鉴定其特异性，在凝胶影像分析仪 Quantity one 软件得出其电泳条带的灰度值( IOD) ，计算目的基因与内参基因比值得到猕猴不同组织 XDH/XO 的 mＲNA 的相对表达量。结果 建立了半定量 ＲT-PCＲ 检测方法，猕猴不同组织 XDH /XO 的 mＲNA 表达在肝脏组织中表达水平最高，其次为心肌，肾脏，睾丸，皮肤。结论 本研究所建立的半定量 ＲT-PCＲ 检测方法可应用于检测猕猴各组织器官组中的 XDH /XO 的mＲNA 的表达差异。