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| FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析 | |
| 引用本文： | 殷长传!遗传工程国家重点实验室,颜学恒!遗传工程国家重点实验室,郑佐华!遗传工程国家重点实验室,黄啸宇!遗传工程国家重点实验室,毛裕民!遗传工程国家重点实验室.FD-TRT耐热逆转录酶的特性分析[J].复旦学报(自然科学版),1998,37(2):225-228. |
| 作者姓名： | 殷长传!遗传工程国家重点实验室 颜学恒!遗传工程国家重点实验室 郑佐华!遗传工程国家重点实验室 黄啸宇!遗传工程国家重点实验室 毛裕民!遗传工程国家重点实验室 |
| 摘 要： | 从嗜热细菌ＦＤ３００９中克隆并分离纯化得到的耐热逆转录酶（ＦＤ－ＴＲＴ），逆转录反应在６５℃高温下进行，可克服常温逆转录酶的许多缺点，以酵母核糖体ｒＲＮＡ为模板，以与２５５和１８Ｓ ｒＲＮＡ匹配的寡聚脱氧核苷酸为引物，探明了ＦＤ－ＴＲＴ的最适反应条件： ２５ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ ８．５，２５℃），２５ ｍｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４，２ ｍｍｏｌ／Ｌ ＭｎＣｌ２，１００ μｇ／ｍｌ明胶．５ ｕｎｉｔ ＲＮａｓｉｎ，２５０ ｍｍｏｌ／Ｌ ４种 ｄＮＴＰ， １μＣｉ３ Ｈ－ｄＣＴＰ， １２ｕｇ ＲＮＡ，２５ ｐｍｏｌ引物，并在此条件下测得 ＦＤ－ＴＲＴ和 Ｔａｑ ＤＮＡ 聚合酶逆转录活力与聚合酶活力的相对比值分别为０．０５６，０．００４５． |
| 关 键 词： | 耐热逆转录酶 高温逆转录 酶活测定 |
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