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| 戊型肝炎病毒ORF2片段在毕赤酵母中的分泌表达及活性鉴定 | |
| 引用本文： | 刘如石,邱义兰,杨坤宇,梁良,张军,夏宁邵.戊型肝炎病毒ORF2片段在毕赤酵母中的分泌表达及活性鉴定[J].湖南师范大学自然科学学报,2005,28(2):57-61. |
| 作者姓名： | 刘如石 邱义兰 杨坤宇 梁良 张军 夏宁邵 |
| 作者单位： | 1. 湖南师范大学生命科学学院生物化学与分子生物学系,中国,长沙,410081;厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,中国,厦门,361005 2. 湖南师范大学生命科学学院生物化学与分子生物学系,中国,长沙,410081 3. 厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,中国,厦门,361005 |
| 基金项目： | 福建省重大科技项目(2002F013). |
| 摘 要： | 为了寻求新型表达系统来研制戊型肝炎病毒基因工程疫苗，利用Pichia pastoris表达系统表达戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2基因．利用PCR扩增HEV ORF2基因，然后将ORF2基因按正确的阅读框融合到Pichia postoris分泌型表达载体pPIC9K的a-因子信号肽编码序列3’端，重组表达载体在电击转化毕赤酵母，经过含G418的营养缺陷型培养基(RDB)筛选、重组酵母基因组总DNA进行PCR鉴定后，证实HEV ORF2基因已经整合到酵母基因组中并得到重组转化子．表型鉴定后对G418具有不抗性的重组菌株诱导表达，用双抗体夹心法ELISA筛选了表达外源蛋白的重组菌株，再经SDS-PAGE与Western blot证实ORF2基因在Pichia pastoris中实现了分泌表达，而且重组蛋白具有较强的特异性与生物学活性；同时用双抗体夹心法证实在Pichia pastoris表达的上清中存在衣壳蛋白聚体． |
| 关 键 词： | 戊型肝炎病毒 衣壳蛋白 重组毕赤酵母 |
| 文章编号： | 1000-2537(2005)02-0057-05 |
| 修稿时间： | 2005年2月11日 |
Secreted Expression of Hepatitis E Virus ORF2 Gene in Pichia pastoris and Identification of Its Biological Activity |
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| LIU Ru-shi,QIU Yi-lan,YANG Kun-yu,LIANG Liang,ZHANG Jun,XIA Ning-shao.Secreted Expression of Hepatitis E Virus ORF2 Gene in Pichia pastoris and Identification of Its Biological Activity[J].Journal of Natural Science of Hunan Normal University,2005,28(2):57-61. | |
| Authors: | LIU Ru-shi QIU Yi-lan YANG Kun-yu LIANG Liang ZHANG Jun XIA Ning-shao |
| Institution: | LIU Ru-shi~ |
| Abstract: | |
| Keywords: | Hepatitis E Virus capsid protein recombinant Pichia pastoris |
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