猕猴桃褪绿环斑相关病毒RT-LAMP-LFD可视化检测方法的建立 |
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引用本文: | 邹佳伶,彭期定,王韵茹,席德慧.猕猴桃褪绿环斑相关病毒RT-LAMP-LFD可视化检测方法的建立[J].四川大学学报(自然科学版),2022,59(1):016004-196. |
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作者姓名: | 邹佳伶 彭期定 王韵茹 席德慧 |
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作者单位: | 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065 |
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基金项目: | 国家自然科学(32070167,31772131);四川省应用基础项目(2019YJ0135);成都市科技局国际合作项目(2020-GH02-00026-HZ) |
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摘 要: | 猕猴桃褪绿环斑相关病毒(Actinidia chlorotic ringspot-associated virus, AcCRaV)是侵染猕猴桃的主要病毒之一.为实现对猕猴桃中AcCRaV的快速检测和监控,本研究建立了一种逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)结合横向流动试纸条(LFD)的检测方法,可实现快速、可视化检测猕猴桃中AcCRaV.本研究基于AcCRaV外壳蛋白基因保守区域,设计了一套LAMP特异性引物,优化后的反应体系在62℃恒温条件下,反应60 min,再进行5 min试纸条显色反应,即可完成样品的检测.检测灵敏性实验结果表明,建立的RT-LAMP-LFD方法具有较高的灵敏性,其检测灵敏度是常规RT-PCR的100倍.二者检测结果一致,LFD试纸条实现了检测结果的可视化.总之,该检测方法可为检测猕猴桃中AcCRaV感染状况提供了一种省时、高效的诊断方法.
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关 键 词: | 猕猴桃 猕猴桃褪绿环斑相关病毒 RT-LAMP 横向流动试纸条 |
收稿时间: | 2021/4/8 0:00:00 |
修稿时间: | 2021/5/13 0:00:00 |
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