| 以MDR1基因启动子为靶点的药物筛选模型的建立 |
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| 引用本文： | 李长龙,萨晓婴,邓皖利,许建华,范忠泽,刘建文. 以MDR1基因启动子为靶点的药物筛选模型的建立[J]. 华东理工大学学报(自然科学版), 2008, 34(5) |
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| 作者姓名： | 李长龙 萨晓婴 邓皖利 许建华 范忠泽 刘建文 |
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| 作者单位： | 华东理工大学药学院,上海,200237;浙江省医学科学院,浙江省实验动物中心,杭州,310013;浙江省医学科学院,浙江省实验动物中心,杭州,310013;上海中医药大学附属普陀中心医院,上海,200062;华东理工大学药学院,上海,200237 |
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| 摘 要： | 通过构建以MDR1启动子为启动序列的荧光素酶报告基因载体,建立基于双荧光素酶报告基因系统的多药耐药抑制剂筛选模型。从HCT-8细胞中提取DNA并克隆含有MDR1基因启动子的序列。将该序列重组到荧光素酶报告基因载体pGL-3-Basic的启动区域中,从而构建报告基因载体pGL-MDR1。将pGL-MDR1和pRL-TK载体共转染到HCT-8和HCT-8/VCR细胞中,建立用于筛选多药耐药抑制剂的方法。通过调节不同载体的比例来优化转染效率。通过MDR1基因激活剂（热诱导）和抑制剂（EGCG）来验证该方法。通过直接测序法验证了pGL-MDR1含有MDR1基因启动子序列且没有出现碱基突变。在n（pGL-MDR1）∶n（pRL-TK）=5∶5时,转染效率最高并具有最高的荧光素酶活性。通过MDR1基因激活处理后表现为时间依赖性地激活MDR1基因的表达,而MDR1基因抑制剂的作用则相反。
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| 关 键 词： | MDR1基因 双荧光素酶报告基因 药物筛选 |
Establishment and Application of a Screening Assay Based on MDR1 Prompter |
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| LI Chang-long,SA Xiao-ying,DENG Wan-li,XU Jian-hua,FAN Zhong-ze,LIU Jian-wen. Establishment and Application of a Screening Assay Based on MDR1 Prompter[J]. Journal of East China University of Science and Technology, 2008, 34(5) |
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| Authors: | LI Chang-long SA Xiao-ying DENG Wan-li XU Jian-hua FAN Zhong-ze LIU Jian-wen |
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