| 果蝇SCS'绝缘子对杆状病毒在哺乳动物细胞中介导基因表达的影响 |
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| 引用本文： | 陆俊峰,尹隽,钟江. 果蝇SCS'绝缘子对杆状病毒在哺乳动物细胞中介导基因表达的影响[J]. 复旦学报(自然科学版), 2012, 51(6) |
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| 作者姓名： | 陆俊峰 尹隽 钟江 |
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| 作者单位： | 复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系,上海,200433 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 将果蝇SCS'绝缘子以不同方向置于CMV启动子和报告基因egfp表达框的上下游,构建了包括对照病毒在内的9个重组杆状病毒.比较了这些病毒转导CHO,BHK和CNE细胞后报告基因表达的情况.结果显示:各株重组病毒的复制没有明显差异,但报告基因的表达水平有明显不同.当SCS'绝缘子位于表达框的上游,并与报告基因同向时,基因的表达水平显著提高.在CHO中,转导后24 h EGFP表达量比对照病毒提高近3倍,egfpmRNA水平也比对照病毒高4倍多.当在表达框上、下游各有一个SCS',且分别与CMV启动子方向-致和相反时,EGFP表达量降低到只有对照病毒的1/3,其mRNA水平也仅是对照病毒的1/6～1/5.丁酸钠和TSA等组蛋白脱乙酰基酶抑制剂处理可以使该病毒介导EGFP表达大幅上升,甚至超过对照病毒.这些结果揭示了杆状病毒在哺乳动物细胞介导基因表达时受到细胞染色质调节机制的影响,也为优化杆状病毒-哺乳动物细胞系基因表达系统提供了新的方法.
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| 关 键 词： | 杆状病毒 BacMam载体 基因表达 SCS'绝缘子 绿色荧光蛋白 |
The Effect of Drosophila SCS' Insulator on Transgene Expression Mediated by Baculovirus in Mammalian Cells |
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