| 水稻硝酸还原酶基因5′上游序列的克隆与序列分析 |
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| 作者姓名： | 胡静 吴文华 |
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| 作者单位： | 湖北大学,生命科学学院,武汉,430062;湖北大学,生命科学学院,武汉,430062 |
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| 基金项目： | 湖北省自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 以日本晴水稻幼苗叶的基因组总DNA为模板,采用PCR方法扩增获得约1 300 bp大小的DNA片段,回收该片段并与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌感受态,并提取质粒DNA.用凝胶电泳检测和酶切鉴定,选取阳性克隆进行测序分析.测序结果显示,该片段含1 376个核苷酸对;应用NCBI网站的BLAST软件对本试验中克隆的序列与GenBank(NC_008401)公布的水稻硝酸还原酶基因启动子序列进行比对,有3个核苷酸差异,同源性为99%,证实本试验中克隆的DNA序列为水稻硝酸诱导基因启动子.该序列含有多个与转录调控有关的保守序列(如TATA-box、CAAT-box和GAGA-box).此序列的成功克隆,为今后开展水稻等重要农作物转基因研究奠定基础.
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| 关 键 词： | 日本晴水稻 硝酸还原酶基因 5′上游序列 基因克隆 |
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