| 摘 要： | 以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究赖氨酸蛋氨酸配比模式对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白合成的影响。试验采用因子试验设计,以蛋氨酸(0.4、0.5、0.6 mmol/L)和赖氨酸(1.0、1.2、1.4、1.5、1.6 mmol/L)的混合物作为试验处理。试验期为48 h,每个处理3个重复,试验重复3次。通过ELISA方法检测添加蛋氨酸和赖氨酸混合物后细胞中酪蛋白的合成量。得出最佳的赖氨酸蛋氨酸配比模式,并采用Real-Time PCR技术检测此水平下乳蛋白基因、与乳蛋白合成转录和翻译相关的基因以及与赖氨酸、蛋氨酸相关的转运载体CAT-1和ASCT-2的表达。结果表明:蛋氨酸(0.4 mmol/L)和赖氨酸(1.2 mmol/L)混合添加时奶牛乳腺上皮细胞总酪蛋白合成量最高为2.95 ppm,并差异极显著。当赖氨酸和蛋氨酸以1.2 mmol/L和0.4 mmol/L即3∶1混合添加时在不影响赖氨酸、蛋氨酸相关的转运载体CAT-1和ASCT-2基因表达的条件下均能极显著地促进乳蛋白基因的表达如:CSN1S1、CSN1S2、CSN2、CSN3和LALBA基因表达均上调,且CSN1S1和LABA表达量最高。与乳蛋白转录相关的STAT5-JAK2信号通路基因的表达均显著上调;与乳蛋白翻译相关的mTOR信号通路的相关基因除EIF4E-BP1显著下调,m TOR和S6K基因的表达均上调且mTOR差异极显著。
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