鲤鱼(Cyprinus carpio L.) GH受体的分子克隆及其两种转录子的发现 |
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作者姓名: | 孙晓凤 郭琼林 胡炜 汪亚平 朱作言 |
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作者单位: | 1. 中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室, 武汉 430072; 2. 中国科学院研究生院, 北京 100039 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展规划(批准号:2001CB109006)、国家自然科学基金(批准号:30371091,30130050)及中国科学院水生生物研究所淡水生态和生物技术国家重点实验室(批准号:2005FB22)资助课题. |
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摘 要: | 应用反转录-PCR及RACE技术,从二龄鲤鱼肝组织中克隆了生长激素受体(GHR)的全长基因,其开放阅读框编码602个氨基酸,其中包括244个氨基酸的胞外激素结合结构域,24个氨基酸的跨膜区域和334个氨基酸的胞内信号传导区域. 序列分析表明:无论在基因水平还是蛋白质水平,鲤鱼GHR与鲫鱼GHR均具有较高的同源性. 用一对基因特异性引物在研究二龄鲤鱼GHR的组织分布时发现:肝与其他组织的扩增产物大小不一致(肝组织中的约小100bp),测序结果以及基因组PCR表明这是由于一个97bp的内含子选择性剪切造成的. 而以同样引物在4月龄鲤鱼各组织扩增的片段大小是一致的,且与二龄鲤鱼肝以外组织的扩增产物大小一致. 鲤鱼GHR两种转录子的出现,系转录时发生拼接变化所致,推测是一种与发育有关的机制. 采用半定量RT-PCR方法分析组织相对表达水平,结果显示:GHR在二龄鲤鱼鳃、胸腺、脑组织的表达水平明显低于4月龄鲤鱼.
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关 键 词: | 生长激素受体(GHR) 分子克隆 转录子 表达分析 鲤鱼 |
收稿时间: | 2005-11-23 |
修稿时间: | 2005-11-232006-01-18 |
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