牛凝乳酶二硫键功能的研究:Cys45的定位突变 |
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引用本文: | 杨海粟,吴华.牛凝乳酶二硫键功能的研究:Cys45的定位突变[J].北京联合大学学报(自然科学版),1994,8(1):33-39. |
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作者姓名: | 杨海粟 吴华 |
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作者单位: | 北京联合大学文理学院,北京师范大学 |
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摘 要: | 以phagemid,pBluescript为载体,把牛凝乳酶原基因的KpnI-KpnI片段插入,将牛凝乳酶45位Cys用Ala取代,根据遗传密码子的兼并性,在其附近引入限制性内切酶ClaI位点.利用寡聚核苷酸介导的定位突变技术,以获得凝乳酶Cys45Ala的突变基因.为了提高突变效率,采用Kunkel等创立的含尿嘧啶单链DNA模板法,经酶切鉴定及双脱氧末端终止法测序,证明已获得预期的突变。
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关 键 词: | 凝乳酶原 凝乳酶 定位突变 二硫键 |
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