| 人类PIF1蛋白质N-末端多肽的表达纯化和 |
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| 引用本文： | 顾永清,朴金莲.人类PIF1蛋白质N-末端多肽的表达纯化和[J].石河子大学学报,2009,27(2). |
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| 作者姓名： | 顾永清 朴金莲 |
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| 作者单位： | 顾永清,GU Yongqing(石河子大学医学院,石河子,832003);朴金莲,PIAO Jinlian(日本广岛大学原爆放射线医科学研究所,广岛,7348553)
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| 摘 要： | 解螺旋酶参与几乎体内所有的DNA代谢,具有重要的生理功能.为了从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能,我们以HeLa细胞的cDNA文库为模版,PCR扩增得到PIF1基因5′端含有1～534核苷酸的cDNA序列-PIFΔC.在PIFΔC的 5′端引入六组氨酸标签后插入pET15b表达载体,得到重组质粒pET15-PIFΔC.以此重组质粒转化RosettaTM 2(DE3)感受态细胞,使PIFΔC蛋白质在大肠杆菌中得到表达.在4℃通过快速液相色谱纯化系统,通过一系列色谱层析柱纯化了PIFΔC蛋白质.以纯化的PIFΔC蛋白质免疫家兔制备了抗血清,并检测了纯化的PIFΔC的生物化学活性.结果显示不含解旋酶模序的人类PIF1蛋白质的N-末端,具有使单链DNA复性的特性.PIF1解螺旋酶具有解开DNA双链和使双链DNA复性这一矛盾的特性,暗示了人类PIF1解螺旋酶可能参与损伤DNA的修复,包括断裂的双链DNA的修复.
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| 关 键 词： | PIF1解螺旋酶 PIFΔC蛋白质 蛋白质纯化 单链DNA复性 |
The Overexpression, Purification and Biological Activity Study of N-terminal Human PIF1 Helicase |
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| GU Yongqing,PIAO Jinlian.The Overexpression, Purification and Biological Activity Study of N-terminal Human PIF1 Helicase[J].Journal of Shihezi University(Natural Science),2009,27(2). |
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| Authors: | GU Yongqing PIAO Jinlian |
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