用酵母双杂交筛选与AP-2α相互作用的因子 |
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引用本文: | 钟英丽,刘云海,胡翔,肖顺勇,张健. 用酵母双杂交筛选与AP-2α相互作用的因子[J]. 湖南师范大学自然科学学报, 2003, 26(3): 73-77 |
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作者姓名: | 钟英丽 刘云海 胡翔 肖顺勇 张健 |
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作者单位: | 湖南师范大学生命科学学院,生物化学与分子生物学系,中国,长沙,410081 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(30070415),湖南省自然科学基金资助项目(00JJY2038) |
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摘 要: | AP—2α是重要的转录因子家族AP—2α的成员之一,为了研究AP—2α在体内的转录调控方式及与其直接相互作用的蛋白因子,用AP—2α作为饵蛋白通过酵母双杂交系统筛选HeLa细胞的cDNA库,筛选得到的一个阳性克隆中,经鉴定含有人TESTIN基因cDNA片段自5876bp起始的完整3′端序列,将此TESTIN片段引入GST基因融合系统成功的进行了表达,得到大小约45kD的GST—TESTIN融合蛋白,用于多克隆抗体的制备,用Western—blot检测TES—TIN和AP—2α在HeLa细胞中的表达和定位,结果表明:TESTIN的表达主要在细胞质中,细胞核内也有少量表达;而AP—2α表达主要集中于细胞核内,它们的相互作用可能与AP—2α在细胞内分布及其调控基因转录的方式有关。
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关 键 词: | 转录因子 AP—2α AP—2α 酵母双杂交 GST基因融合系统 cDNA文库 转录调控 基因表达 |
文章编号: | 1000-2537(2003)03-0073-05 |
修稿时间: | 2003-03-20 |
Identify the Interacting Partners of AP-2α Using Yeast Two-hybrid System |
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