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| 牛病毒性腹泻病毒GSTZ株E1基因原核表达载体的构建及表达 | |
| 作者单位： | ;1.西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室;2.西北民族大学甘肃省动物细胞工程技术研究中心;3.西北民族大学生命科学与工程学院;4.中国农业科学院上海兽医研究所 |
| 摘 要： | 为研究牛病毒性腹泻病毒的囊膜糖蛋白E1的抗原性,参考了Oregon C24V BVDV毒株的基因组序列(AF091605.1),并设计一对特异引物(上游引物5’-CCC GGA TCC ATG GCC TCT CCC TAC TGT-3’,下游引物5’-GGG CTC GAG TTA CCC TTG TGC TCC TGT T-3’),利用RT-PCR从病毒基因组中扩增E1基因609 bp全长片段,测序结果表明,与C24V株核苷酸同源性达100%.扩增产物经BamHI和XhoI双酶切,亚克隆至原核表达载体,双酶切鉴定表明成功构建了重组表达载体pET-32a(+)-E1.重组表达载体转化BL21(DE3)宿主菌,IPTG诱导表达,经SDSPAGE和Western-blot检测,成功诱导表达出25ku E1蛋白.实验结果为进一步研究BVDVE1蛋白的功能提供了参考. |
| 关 键 词： | 牛病毒性腹泻病毒 E1基因 原核表达 |
Construction of Prokaryotic Recombinant Vector of E1 Gene of Bovine Viral Diarrhea and Its Induced Expression |
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