单链莫奈林基因表达载体的构建及其分泌表达 |
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引用本文: | 袁汉英,艾华水,范长胜,高卜渝,黄路生,李育阳.单链莫奈林基因表达载体的构建及其分泌表达[J].复旦学报(自然科学版),2003,42(4):536-540. |
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作者姓名: | 袁汉英 艾华水 范长胜 高卜渝 黄路生 李育阳 |
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作者单位: | 1. 复旦大学,生命科学学院,上海,200433 2. 江西农业大学,江西省动物生物技术重点实验室,南昌,330045 |
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摘 要: | 根据甜蛋白莫奈林的氨基酸序列,选择酵母偏爱密码子,化学合成单链莫奈林(Single-Chain Monellin,SCM)基因片段,并拼接成全基因.基因的DNA序列分析表明,合成的单链莫奈林基因与设计的一致.该基因插入于毕赤氏酵母整合型质粒pPIC9K中置于AOXI启动子的控制下,并通过电转化技术将重组质粒pPIC9K/SCM导入Pichia pastoris,在含有G418的YEPD平板上筛选整合型的多拷贝的转化子.转化子在BMMY培养基中经甲醇诱导表达,用SDS-PAGE检测发酵液,表明SCM的分泌表达蛋白可达发酵液蛋白含量的90%.
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关 键 词: | 单链莫奈林基因 毕赤氏酵母 分泌表达 |
文章编号: | 0427-7104(2003)04-0536-05 |
Construction of the Expression Vector for Single-chain Monellin Gene and Its Secretion Expression |
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Abstract: | |
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Keywords: | Single-chain monellin gene(SCM) Pichia pastoris secretion expression |
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