| 用复制酶基因cDNA探针检测表达病毒外壳蛋白基因马铃薯中的PLRV |
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| 引用本文： | 张鹤龄,梁成罡,冯晓冬. 用复制酶基因cDNA探针检测表达病毒外壳蛋白基因马铃薯中的PLRV[J]. 内蒙古大学学报(自然科学版), 1997, 0(2) |
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| 作者姓名： | 张鹤龄 梁成罡 冯晓冬 |
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| 作者单位： | 内蒙古大学生物学系 |
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| 摘 要： | 利用马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）复制酶基因３′端长约６００ｂｐ的ｃＤＮＡ，用缺口平移方法进行３２Ｐ同位素标记，制备成ｃＤＮＡ探针，通过核酸斑点杂交，对提纯的马铃薯卷叶病毒（ＰＬＲＶ）、病毒ＲＮＡ、ＰＬＲＶ感染的马铃薯汁液，表达ＰＬＲＶＣＰ基因的马铃薯叶片及块茎芽进行了检测．结果表明，３２Ｐ标记的复制酶基因ｃＤＮＡ探针特异性强、灵敏度高．可测得提纯病毒的最低含量为４０８ｎｇ／ｍｌ，病毒ＲＮＡ最低量为２７．８ｐｇ／ｍｌ，未转ＣＰ基因接种ＰＬＲＶ的马铃薯叶片提取液的最高稀释度为１３７５．接种ＰＬＲＶ的转ＣＰ基因的抗性马铃薯块茎芽和叶片提取液的最高稀释度为０～１／１５．此探针和只转入病毒外壳蛋白基因，不接种ＰＬＲＶ的转基因马铃薯汁液不发生反应．表明，探针只与ＰＬＲＶ基因组ＲＮＡ特异反应，而不与外壳蛋白基因及其ｍＲＮＡ反应，从而为表达ＣＰ基因的转基因马铃薯中ＰＬＲＶ的检测和抗病性鉴定建立了一种可靠的灵敏的分子生物学技术．此项技术已用于转ＣＰ基因马铃薯Ｄｅｓｉｒｅ，Ｆａｖｏｒｉｔａ，乌盟６０１和虎头的抗病性鉴定
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| 关 键 词： | 马铃薯卷叶病毒 转基因马铃薯 复制酶基因cDNA探针 核酸斑点 杂交 |
Detection of PLRV in Transgenic Potato Expressing Coat Protein Gene by RdRp cDNA Probe |
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| Zhang Heling Liang Chenggang Feng Xiaodong. Detection of PLRV in Transgenic Potato Expressing Coat Protein Gene by RdRp cDNA Probe[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Neimongol, 1997, 0(2) |
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| Authors: | Zhang Heling Liang Chenggang Feng Xiaodong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | potato leafroll virus cDNA probe of RdRp nucleic acid spot hybridization transgenic potato |
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