| 小鼠脂多糖应答蛋白mlrpS的载体构建及融合蛋白表达 |
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| 引用本文： | 代忠明 陈苏民 陈南春 杜可军 骆文静 陈景元. 小鼠脂多糖应答蛋白mlrpS的载体构建及融合蛋白表达[J]. 科学技术与工程, 2006, 6(8): 936-938946 |
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| 作者姓名： | 代忠明 陈苏民 陈南春 杜可军 骆文静 陈景元 |
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| 作者单位： | 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,西安,710033;第四军医大学劳动卫生与环境卫生学教研室,西安,710033 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30400413）资助. |
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| 摘 要： | 为构建小鼠mlrpS-cDNA基因原核、真核表达载体，大肠杆菌表达其融合蛋白。采用反转录-聚合酶链反应从经脂多糖刺激的鼠NIH3T3细胞cDNA中，扩增出编码mlrpS的cDNA。用限制性内切酶KpnⅠand XhoⅠ消化后，插入原核表达载体pTAT中，经酶切鉴定与测序证实后，转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株。异丙基β—D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导产生融合蛋白。经KpnⅠ和XhoⅠ酶切回收mlrpS-cDNA，插入pcDNA3．1载体中；pcDNA3．1-mlrpS再经KpnⅠ和ApaⅠ酶切后，插入到pEGFP—c1载体上，构建pEGFP-mlrpS融合的真核表达载体。构建mlrpS表达载体经测序证实，与GenBank登录的序列完全一致；双酶切鉴定证实，克隆基因正确插入载体pEGFP及pTAT；SDS—PAGE证实融合蛋白表达成功。说明：成功地构建了mlrpS原核、真核表达载体，成功正确表达了6His／mlrpS融合蛋白。
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| 关 键 词： | mlrpS 脂多糖应答基因 表达载体 溶核蛋白 |
| 文章编号： | 1671-1815(2006)08-0936-04 |
| 收稿时间： | 2005-12-19 |
| 修稿时间： | 2005-12-19 |
Construction of Expression Vector of mlrpS, A Mouse Protein of Lipopolysaccharide Response and Expression of mlrpS Fusion Protein |
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| DAI Zhongming,CHEN Sumin,CHEN Nanchun,DU Kejun,LUO Wenjing,CHEN Jingyuan. Construction of Expression Vector of mlrpS, A Mouse Protein of Lipopolysaccharide Response and Expression of mlrpS Fusion Protein[J]. Science Technology and Engineering, 2006, 6(8): 936-938946 |
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| Authors: | DAI Zhongming CHEN Sumin CHEN Nanchun DU Kejun LUO Wenjing CHEN Jingyuan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | mlrpS lipopolysaccharide response gene expression vector fusion protein |
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