| 长肌球蛋白轻链激酶的5DFRXXL序列促使肌动蛋白聚集成束 |
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| 引用本文： | 杨春香,魏冬梅,陈晨,余卫平,朱敏生.长肌球蛋白轻链激酶的5DFRXXL序列促使肌动蛋白聚集成束[J].科学通报,2005,50(19):2085-2091. |
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| 作者姓名： | 杨春香 魏冬梅 陈晨 余卫平 朱敏生 |
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| 作者单位： | 南京大学模式动物研究所,南京,210061;东南大学医学院,南京,210009;南京大学模式动物研究所,南京,210061;南京大学模式动物研究所,南京,210061;南京大学模式动物研究所,南京,210061;东南大学医学院,南京,210009 |
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| 基金项目： | 顾鹏宇在激光共聚焦显微镜观察中给予了很大帮助,在此表示感谢.本工作为国家自然科学基金（批准号：30470852）和国家攻关计划（批准号：21001BA710B）资助项目. |
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| 摘 要： | 长肌球蛋白轻链激酶(L-MLCK)含有5个DFRXXL序列, 可与丝状肌动蛋白(F-actin)结合. 结合动力学结果提示, 一个DFRXXL序列可与F-actin中的一个单体结合, 但其生物学意义仍不清楚. L-MLCK的5DFRXXL序列既然含有多个actin的结合位点, 推测有可能它通过该序列发挥一个F-actin成束蛋白的作用. 为此, 体外表达并纯化了HA标记的重组5DFRXXL蛋白, 并通过结合动力学实验分析了重组5DFRXXL蛋白与肌丝或F-actin的结合特征, 结果表明, 重组5DFRXXL蛋白与F-actin和肌丝均具有较高的亲和力, 其中与肌丝的结合常数KD为0.45 μmol/L, 与F-actin的结合常数为0.41 μmol/L. 通过交联实验发现, 重组5DFRXXL蛋白可以有效地交联F-actin并使其形成大分子聚集物. 应用激光共聚焦和电子显微镜方法观察到该聚集物具有典型的F-actin蛋白束结构. 将5DFRXXL的表达质粒转染真核细胞后, 可见5DFRXXL能促使细胞边缘的“微绒毛”结构形成, 可能与5DFRXXL聚集F-actin的活性有关. 这些结果表明, L-MLCK除能通过其磷酸激酶活性控制细胞收缩外, 还可能作为一个新的F-actin成束蛋白影响细胞骨架形成.
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| 关 键 词： | 肌球蛋白轻链激酶 肌丝 肌动蛋白 成束蛋白 |
| 收稿时间： | 2005-04-28 |
| 修稿时间： | 2005-04-282005-07-21 |
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