新型PCV2衣壳融合蛋白在HEK293F细胞瞬时表达研究

猪圆环病毒2型（Porcine Circovirus type 2,PCV2）衣壳（Capsid）蛋白是制备抗猪圆环2型病毒亚单位疫苗的有效免疫抗原，能在大肠杆菌及杆状病毒/昆虫细胞表达系统中获得表达，然而在哺乳细胞中的表达研究仍然缺乏。瞬时表达条件考察结果显示，采用宿主HEK293F细胞及PEI-40kDa转染试剂能获得35%病毒PCV2 Capsid基因细胞转染效率。转染试剂PEI(Polyethylenimine)与DNA比例差异会影响复合物形成大小及形态，复合物形成15～80 nm颗粒有利于转染效率的提高。实验以免疫逃逸型猪圆环病毒2b型NDSU41513病毒株，设计了新型PCV2 Capsid (△1-41aa)-Fc(pig) protein(PCFP)分子。在3 L反应器中成功实现了HEK293F细胞瞬时表达PCFP，表达水平达到3.8 mg/L。PCFP蛋白能够自主装形成约为41 nm类病毒颗粒，诱导小鼠机体内产生强烈的体液免疫反应，具有很高的应用潜力。