| Cpf1 和 Cas9核酸酶靶向EGFR-L858R突变的研究 |
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| 作者姓名： | 魏恒 杨梅佳 钟坤宏 仝爱平 |
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| 作者单位： | 四川大学生命科学学院,四川大学华西医院肿瘤中心,肿瘤免疫治疗实验室,四川大学华西医院肿瘤中心,肿瘤免疫治疗实验室,四川大学华西医院肿瘤中心,肿瘤免疫治疗实验室 |
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| 摘 要： | 表皮生长因子受体(EGFR)单核苷酸突变(2573TG,L858R)占所有EGFR突变的90%.使突变的EGFR失活对有此突变的病人非常有利.这里,应用双荧光报告分析的方法分析规律成簇间隔短回文重复(CRISPR)系统中Cpf1和Cas9在靶向EGFR-L858R突变的编辑效率.在EGFR-L858R突变位点的附近,有两个Cpf1前间区序列邻近基序(PAMs)——TTTN.并且,2573TG突变形成了一个Cas9的PAM——NGG.因此本文通过构建两条AsCpf1的gRNAs(gRNA1和gRNA2)和一条SpCas9的gRNA(gRNA3)在体外通过双荧光蛋白分析系统去评估SpCas9和AsCpf1特异性靶向等位基因的能力.结果证实了AsCpf1和SpCas9都能够特异性的编辑突变的EGFR(2573TG).
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| 关 键 词： | CRISPR Cas9 CRISPR Cpf1 EGFR L858R 靶向治疗 |
| 收稿时间： | 2017-03-29 |
| 修稿时间： | 2017-05-10 |
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