| HIV-1外膜蛋白gp120在酵母Pichia pastoris中的表达 |
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| 引用本文： | 冯劼,朱娟莉,董兆麟,陈超.HIV-1外膜蛋白gp120在酵母Pichia pastoris中的表达[J].西北大学学报,2009,39(5). |
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| 作者姓名： | 冯劼 朱娟莉 董兆麟 陈超 |
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| 作者单位： | 冯劼,董兆麟(西北大学,生命科学学院,陕西,西安,710069);朱娟莉(陕西北美基因股份公司,陕西,西安,710069);陈超(西北大学,生命科学学院,陕西,西安,710069;国家微检测系统工程技术研究中心) |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 用巴斯德毕赤酵母系统表达HIV外膜糖蛋白gp120.方法 将从HIV-1型国际标准株pHXB2-gp160的基因序列中扩增出的gp 120分子的长片段基因(1 419 bp)和短片段基因(417bp)分别克隆入真核表达载体pPICZαA与pPICZB中,以电穿孔法转化酵母GS 115.用YPDS-zeo平板筛选重组子、PCR方法检测整合到酵母菌GS 115基因组中的gp 120片段基因,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物.结果 诱导后gp 120短片段多肽在GS 115中少量表达,在诱导表达24 h重组蛋白表达量及抗原性达到最高,表达产物被降解,具有良好的抗原特异性.诱导后gp 120长片段多肽未被GS 115所表达.结论 在巴斯德毕赤酵母中成功表达gp 120分子长片段需要优化gp 120基因,为制备HIV-1的诊断抗原和基因工程重组疫苗打下基础.
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| 关 键 词： | 人免疫缺陷病毒Ⅰ型 基因克隆 蛋白表达 毕赤酵母 |
Expression of HIV-1 gp 120 in methylotrophic Pichia Pastoris |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | gp 120 |
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