| 柔嫩艾美耳球虫Serpin基因在293T细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 王晔,韩红玉,董辉,赵其平,朱顺海,姜连连,薛璞,舒凡帆,黄兵.柔嫩艾美耳球虫Serpin基因在293T细胞中的表达[J].复旦学报(自然科学版),2015,54(2). |
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| 作者姓名： | 王晔 韩红玉 董辉 赵其平 朱顺海 姜连连 薛璞 舒凡帆 黄兵 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室,上海,200241 |
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| 摘 要： | 为了检测柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,Et)丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine protease inhibitor,Serpin)基因(EtSerpin)在真核细胞293T中的表达情况,以Et孢子化卵囊cDNA为模板,经PCR扩增含完整Serpin开放阅读框的序列,将其克隆至pGEM-Teasy载体,构建pGEM-Teasy-EtSerpin质粒,双酶切回收目的片段后与相应酶切的真核表达载体pCAGGS连接,构建真核重组表达质粒pCAGGS-EtSerpin.该重组质粒经酶切和测序鉴定正确后转染293T细胞,用间接免疫荧光法和Western blot鉴定EtSerpin基因的表达情况,间接免疫荧光实验可以检测到红色荧光,Western blot结果显示出大小约45.5kDa的目的蛋白条带,结果表明构建的EtSerpin可以在293T细胞中获得表达.
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| 关 键 词： | 柔嫩艾美耳球虫 Serpin基因 293T细胞 真核表达 |
Expression of Eimeria tenella Serpin Gene in 293T Cell |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Eimeria tenella Serpin 293T cell eukaryotic expression |
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