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| RNA干扰技术抑制SGIV ICP18绿色荧光融合蛋白表达的研究 | |
| 引用本文： | 夏立群,张红莲,梁海鹰,秦启伟. RNA干扰技术抑制SGIV ICP18绿色荧光融合蛋白表达的研究[J]. 中山大学学报(自然科学版), 2011, 50(1) |
| 作者姓名： | 夏立群 张红莲 梁海鹰 秦启伟 |
| 作者单位： | 1. 广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524025;中山大学生命科学学院∥有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广东,广州,510275 2. 广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524025 3. 中国科学院南海海洋研究所∥海洋生物资源可持续利用重点实验室,广东,广州,510301 |
| 基金项目： | 国家863计划资助项目，国家自然科学基金资助项目，广东省科技攻关资助项目 |
| 摘 要： | 将含有新加坡石斑鱼虹彩病毒（Singapore grouper iridovirus，SGIV）ICP18基因的真核表达载体pEGFP-ICP18转染到胖头鲤细胞（Fathead minnow cells，FHM）中进行融合表达，用荧光显微镜观察到ICP18 GFP融合蛋白呈点状分布于FHM细胞的细胞质中。根据SGIV ICP18的序列，设计并体外化学合成了特异性干扰SGIV ICP18的siRNA（siRNA ICP18），与pEGFP ICP18共转染到FHM细胞中，通过荧光显微镜观察不同时间点的荧光强度变化。与序列非特异性siRNA（siRNA negative）阴性对照相比，转染后24~48 h，共转染siRNA ICP18和pEGFP ICP18的实验细胞中发荧光的细胞数量较阴性对照少60%~80%左右，说明体外化学合成的siRNA-ICP18可有效抑制FHM细胞中外源导入SGIV ICP18基因的表达。 |
| 关 键 词： | RNA干扰 绿色荧光蛋白 石斑鱼虹彩病毒SGIV ICP18 |
| 收稿时间： | 2009-11-01; |
The Inhibition of Expression of SGIV ICP18-GFP in FHM Cell by RNA Interferencing |
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| XIA Liqun,ZHANG Honglian,HANG Haiying,QIN Qiwei. The Inhibition of Expression of SGIV ICP18-GFP in FHM Cell by RNA Interferencing[J]. Acta Scientiarum Naturalium Universitatis Sunyatseni, 2011, 50(1) | |
| Authors: | XIA Liqun ZHANG Honglian HANG Haiying QIN Qiwei |
| Affiliation: | XIA Liqun 1,2,ZHANG Honglian 1,LIANG Haiying 1,QIN Qiwei3(1.College of Fishery,Guangdong Ocean University,Zhanjiang 524025,China,2.State Key Laboratory of Biocontrol,Sun Yat-sen University,Guangzhou 510275,3.South China Sea Institute of Oceanology,Guangzhou 510301,China) |
| Abstract: | Singapore grouper iridovirus(SGIV) is a major pathogen resulting in heavy economic losses to grouper aquaculture.In this study,recombant eukaryotic vector pEGFP-ICP18 which inserted with SGIV ICP18 gene was transfected into Fathead minnow(FHM) cells,and ICP18-GFP fusion protein was successfully expressed in FHM cells with a finely punctate cytoplasmic pattern.Candidate siRNA targeting SGIV ICP18 gene(siRNA-ICP18) was designed and chemically synthesized.To investigate the inhibition effect of siRNA-ICP18,pEG... |
| Keywords: | ICP18 |
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