| 六种核酸提取试剂盒对粪样中小鼠肝炎病毒核酸 提取效率的比较 |
| |
| 引用本文： | 桂飞,杨伟伟,俞利平,戴方伟,杜江涛,宋晓明.六种核酸提取试剂盒对粪样中小鼠肝炎病毒核酸 提取效率的比较[J].实验动物科学,2019,36(1):31-35. |
| |
| 作者姓名： | 桂飞 杨伟伟 俞利平 戴方伟 杜江涛 宋晓明 |
| |
| 作者单位： | 杭州师范大学实验动物中心;浙江省医学科学院实验动物中心 |
| |
| 基金项目： | 浙江省科技计划项目(No.2015C37107;2016C37106);杭州市重大科技专项(No.20142013A62) |
| |
| 摘 要： | 目的 比较六种商品化试剂盒在小鼠粪便中提取小鼠肝炎病毒(MHV)RNA的效率，筛选出效率高、耗时短的核酸提取方法。方法 采集感染MHV小鼠的新鲜粪便样本，分别用液氮研磨法、磁珠匀浆法以及PBS溶解离心法进行处理，通过同一核酸提取试剂盒比较病毒核酸提取效率，明确最佳样本前处理方法；之后，用6种试剂盒进行RNA提取，经反转录后进行TaqMan实时定量PCR检测，以Ct值评价6种试剂盒的提取效率，结合产物测序和血清抗体ELISA结果，筛选MHV的最佳核酸提取方法。结果 对于粪便样本的前处理，液氮研磨法的RNA提取效率显著高于磁珠匀浆法。对于6种试剂盒的提取效果，TIANGEN DP422总RNA浓度：(549.70±52.38) ng/μL，Ct值：(24.51±0.10)]核酸提取效率最高；TIANGEN SD101总RNA浓度：(274.13±6.87) ng/μL，Ct值：(2.39±0.017)]和QIAGEN 52904总RNA浓度：(288.13±15.11) ng/μL，Ct值：(2.40±0.012)]用时最短；XS VRL总RNA浓度：(348.80±15.85) ng/μL，Ct值：(24.70±0.13)]操作最为方便。结论 粪便样本前处理建议采用液氮研磨法。针对粪便中MHV RNA的提取，TIANGEN DP422提取效率最高，推荐用于小鼠肝炎病毒的分子生物学检测。
|
| 关 键 词： | 小鼠肝炎病毒 病毒RNA提取 TaqMan探针 实时荧光定量PCR |
Comparation of Six Nucleic Acid Extraction Kits in the Extraction Efficiecy of Hepatitis Virus Nucleic Acid in Fecal Samples |
| |
| GUI Fei,YANG Weiwei,YU Lipin,DAI Fangwei,DU Jiangtao,SONG Xiaoming.Comparation of Six Nucleic Acid Extraction Kits in the Extraction Efficiecy of Hepatitis Virus Nucleic Acid in Fecal Samples[J].Shiyan Dongwu Kexue,2019,36(1):31-35. |
| |
| Authors: | GUI Fei YANG Weiwei YU Lipin DAI Fangwei DU Jiangtao SONG Xiaoming |
| |
| Institution: | (Center of Laboratory Animals, Hangzhou Normal University , Hangzhou 310036 , China;Center of Laboratory Animals , Zhejiang Academy of Medical Sciences , Hangzhou 310013 , China) |
| |
| Abstract: | GUI Fei;YANG Weiwei;YU Lipin;DAI Fangwei;DU Jiangtao;SONG Xiaoming(Center of Laboratory Animals, Hangzhou Normal University , Hangzhou 310036 , China;Center of Laboratory Animals , Zhejiang Academy of Medical Sciences , Hangzhou 310013 , China) |
| |
| Keywords: | Mouse Hepatitis Virus ( MHV ) viral RNA extraction TaqMan probe Real-time fluorescent quantitative PCR |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《实验动物科学》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《实验动物科学》下载免费的PDF全文 |
