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猪冠状动脉平滑肌细胞的分离、培养及鉴定
作者姓名:杨敬辉  吴秀丽  王冠峰  陈文伟  李芬
作者单位:河南师范大学生命科学学院;河北农业大学海洋学院;河南师范大学资源微生物与功能分子河南省高校重点实验室培育基地;
基金项目:国家自然科学基金(30600343);河南省重点科技攻关(092102310026);河南省高校科技创新团队支持计划资助(13IRTSTHN009)
摘    要:目的:建立体外分离培养猪冠状动脉血平滑肌细胞(PCASMC)的技术方法并观察其生长特征.方法:酶联合消化法原代分离猪冠状动脉来源的CASMC,利用倒置显微镜观察细胞生长情况;免疫荧光染色法鉴定细胞;台盼蓝法、绘制生长曲线法测定冠状动脉PCASMC传代细胞的成活率和生长特征.结果:分离培养的细胞3d后呈梭形生长,7~8d后生长迅速可传代;第2代细胞在显微镜下观察3~5d即可见典型"峰-谷"状生长;免疫荧光染色显示胞浆内α-平滑肌肌动蛋白表达阳性,细胞成活率为97.5%;细胞生长曲线近似"S"形.结论:本研究建立了高效分离和培养PCASMC的方法,细胞均稳定地表达α-平滑肌肌动蛋白,为血管疾病的研究提供了理想的细胞模型.

关 键 词:  冠状动脉平滑肌细胞  原代培养  鉴定
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