| 褐飞虱乙酰胆碱酯酶启动子的克隆及表观遗传分析 |
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| 引用本文： | 方君,杨潇,朱利航,陈俊,杨之帆.褐飞虱乙酰胆碱酯酶启动子的克隆及表观遗传分析[J].湖北大学学报(自然科学版),2020,42(4):377-383. |
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| 作者姓名： | 方君 杨潇 朱利航 陈俊 杨之帆 |
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| 作者单位： | 湖北大学生命科学学院,省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室,湖北 武汉 430062,湖北大学生命科学学院,省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室,湖北 武汉 430062,湖北大学生命科学学院,省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室,湖北 武汉 430062,武汉科技大学化学与化工学院,湖北 武汉 430081,湖北大学生命科学学院,省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室,湖北 武汉 430062 |
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| 摘 要： | 褐飞虱Nilaparvata lugens是水稻的重要害虫之一.本研究旨在扩增褐飞虱乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)基因的启动子,并从表观遗传学的角度探讨DNA甲基化与褐飞虱生物型进化间的关系.采用染色体步移(genome walking)方法扩增AChE启动子,根据所得启动子序列设计甲基化特异性PCR(MS-PCR)引物和重亚硫酸盐测序法BSP引物,分析褐飞虱生物型Ⅰ和生物型Ⅱ中AChE启动子的甲基化程度,然后利用荧光定量PCR技术检测AChE的表达水平差异.结果表明,扩增得到褐飞虱AChE上游侧翼DNA序列长度为1 919 bp,启动子元件分析显示,AChE启动子区域中有若干与MYB、WRKY、ARE等抗性相关转录因子的结合位点(元件),表明该启动子可能与逆境胁迫相关.基于甲基化水平的限制酶酶切位点分析发现,AChE启动子区域含有多个~(5m)CG甲基化位点,表明该区域DNA甲基化主要发生在胞嘧啶的C-5位.MS-PCR分析表明,生物型Ⅰ褐飞虱AChE启动子区域的甲基化程度高于生物型Ⅱ; BSP结果显示生物型Ⅰ启动子区域总体平均甲基化频率(24. 09%)高于生物型Ⅱ(7. 27%);实时定量PCR结果显示,AChE在生物型Ⅱ中的表达量高于生物型Ⅰ.本研究克隆得到AChE启动子序列,并证实褐飞虱生物型间AChE的表达存在差异,且启动子区域高甲基化水平可能是导致AChE低表达的原因之一.
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| 关 键 词： | 褐飞虱 乙酰胆碱酯酶基因启动子 DNA甲基化 基因表达 生物型 |
Cloning and epigenetic analysis of Acetylcholinesterase promoter from the brown planthopper Nilaparvata lugens ( Hemiptera: Delphacidae ) |
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| FANG Jun,YANG Xiao,ZHU Lihang,CHEN Jun,YANG Zhifan.Cloning and epigenetic analysis of Acetylcholinesterase promoter from the brown planthopper Nilaparvata lugens ( Hemiptera: Delphacidae )[J].Journal of Hubei University(Natural Science Edition),2020,42(4):377-383. |
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| Authors: | FANG Jun YANG Xiao ZHU Lihang CHEN Jun YANG Zhifan |
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