人乳头瘤病毒16和52型双荧光等温多自配引发扩增的 |
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作者姓名: | 崔玉伟 牟颖 马莉 丁雄 方宗宇 王焰 吴青青 |
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作者单位: | 1. 贵州医科大学附属医院 中心实验室, 贵阳 550004;2. 浙江大学 工业控制技术国家重点实验室, 智能系统与控制研究所, 分析仪器研究中心, 杭州 310058 |
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摘 要: | 应用等温多自配引发扩增(IMSA)技术, 分别针对人乳头瘤病毒(HPV)16型的E7和52型的E6基因序列设计6条特异性引物, 并在检测体系中加入羟基萘酚蓝(HNB)和SYBR GreenⅠ的混合双荧光指示剂, 建立快速检测人乳头瘤病毒的双荧光IMSA方法. 结果表明: 340 μmol/L HNB与1∶10 000 SYBR GreenⅠ混合构建的双荧光指示剂在IMSA反应体系中具有明确的指示效果, 455 nm蓝光激发下阳性反应管双荧光显色为黄绿色, 阴性反应管双荧光显色为橘红色; 该方法对HPV16和HPV52型检测限分别达60,600拷贝/μL, 可特异性检出样品中HPV16和HPV52, 与临床检测结果比对无差异.
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关 键 词: | 人乳头瘤病毒16型 人乳头瘤病毒52型 等温多自配引发扩增 双荧光 |
收稿时间: | 2017-12-18 |
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