纳豆激酶基因克隆及其在大肠杆菌中活性表达研究 |
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引用本文: | 闫达中,许芳,李洁,冯建成,杨艳燕. 纳豆激酶基因克隆及其在大肠杆菌中活性表达研究[J]. 湖北大学学报(自然科学版), 2003, 25(1): 69-72,92 |
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作者姓名: | 闫达中 许芳 李洁 冯建成 杨艳燕 |
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作者单位: | 湖北大学生命科学学院,湖北武汉430062 |
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基金项目: | 湖北省教育厅重点项目(2000A01018) |
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摘 要: | 以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增了纳豆激酶基因(natto kinase gene)中编码前肽、成熟肽的核苷酸序列(pro-NK),构建大肠杆菌表达质粒pTYB102,转化大肠杆菌ER2566。在IPTG诱导下,分别在15℃(14h)、30℃(3h)、37℃(2h)条件下培养,pTYB102均能表达出有活性的纳豆激酶。实验证实纳豆激酶基因得到活性表达需要Pro序列。SDS-PAGE表明,15℃和30℃和37℃培养表达的杂蛋白更少。薄层扫描测定表达的纳豆激酶占菌体总蛋白30%以上。
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关 键 词: | 纳豆激酶 基因克隆 大肠杆菌 基因表达 |
文章编号: | 1000-2375(2003)01-0069-04 |
Molecular Cloning and expression of natto kinase gene in Escherichia coli |
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Abstract: | |
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Keywords: | natto kinase gene cloning Escherichia coli expression |
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