| 人凝血因子X单克隆抗体的研制及鉴定 |
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| 引用本文： | 林方昭,肖小璞,黄淑,周昌华,肖玲,周宇,赵青蓉,李湘.人凝血因子X单克隆抗体的研制及鉴定[J].四川大学学报(自然科学版),2002(Z1). |
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| 作者姓名： | 林方昭 肖小璞 黄淑 周昌华 肖玲 周宇 赵青蓉 李湘 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院 中国医学科学院 中国协和医科大学 输血研究所 中国协和医科大学 中国协和医科 |
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| 摘 要： | 目的 用于提取高纯度凝血因子X(FX)和制备缺乏FX血浆 ,以及建立FX抗原的ELISA检测方法等 .方法 用较高纯度的FX免疫Balb/C小鼠 ,经过 2次基础免疫 ,1次加强免疫 ,3d后取其脾细胞与骨髓瘤SP2 /0 Ag14细胞在PEG作用下进行细胞融合 ,经间接ELISA法筛选杂交瘤细胞株 ,通过免疫印迹试验、交叉反应试验、相加试验和二价金属离子依赖性试验等 ,对单克隆抗体进行鉴定 .结果 经 3～ 4次克隆化后获得了 10株能稳定分泌FX单克隆抗体 (FXMcAb)的杂交瘤细胞株 ,Ig亚类均为IgG1型 ,小鼠腹水效价均在 10 6以上 ,FXMcAb只与FX抗原起特异性反应 ,FXMcAb与FX抗原的结合不同程度地依赖于二价金属离子Zn2 .结论 所筛选出的FXMcAb为高纯度FX的提取和缺乏FX血浆的制备以及FX抗原的ELISA检测方法的建立 ,提供了试剂准备 .
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| 关 键 词： | 凝血因子X 抗原 单克隆抗体 杂交瘤细胞 |
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