干扰FOS表达对KSHV感染的神经元细胞增殖的影响 |
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引用本文: | 徐慧玲,曹冬冬,李英,张晓艳,吴淑媛,王晓露,潘泽民,李冬妹.干扰FOS表达对KSHV感染的神经元细胞增殖的影响[J].石河子大学学报,2020,38(3). |
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作者姓名: | 徐慧玲 曹冬冬 李英 张晓艳 吴淑媛 王晓露 潘泽民 李冬妹 |
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作者单位: | 石河子大学医学院生物化学教研室/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室,新疆 石河子832002;新疆生产建设兵团第八师石河子市妇幼保健院,新疆 石河子832000 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;研究生科研创新项目 |
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摘 要: | 目的探讨在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma associated herpesvirus,KSHV)感染的神经元细胞中干扰FOS基因表达,对细胞增殖和KSHV病毒的影响。方法采用强力霉素和丁酸钠诱导islk.219细胞的病毒r KSHV.219进入裂解态并提取病毒,采用病毒提取液感染SH-SY5Y细胞,采用荧光显微镜观察GFP确定感染成功,采用real time-PCR检测KSHV感染与未感染SH-SY5Y细胞FOS基因的表达;构建FOS基因的干扰质粒;并与KSHV感染的SH-SY5Y细胞中干扰FOS的表达,采用real time-PCR和Western blot确定干扰效率,采用real time-PCR检测干扰与未干扰细胞中KSHV病毒因子LANA、RTA以及K8. 1的mRNA表达情况,采用MTT法检测细胞增殖能力,PI染色结合流式细胞技术检测细胞周期;结果重组病毒r KSHV. 219能够成功感染SH-SY5Y细胞,FOS基因在KSHV感染的SH-SY5Y细胞中表达上调(P0.05);干扰FOS基因后,FOS基因的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P0.05); KSHV病毒因子LANA、RTA以及K8. 1的mRNA表达水平均有降低(P0.05); MTT结果提示,干扰FOS表达抑制了KSHV感染的SH-SY5Y细胞增殖(P0.05);干扰48 h后感染细胞周期被阻滞在G0/G1期(P0.05)。结论 KSHV能够感染神经元细胞SH-SY5Y,干扰FOS表达能抑制感染细胞的增殖,阻滞细胞周期G0/G1期的进程,靶向干扰FOS在KSHV感染引起的神经系统疾病的治疗中具有一定的价值。
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关 键 词: | 卡波氏肉瘤相关疱疹病毒 FOS 神经元细胞 增殖 |
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