| vMIP-Ⅱ肽在大肠杆菌中的双辅助子高效表达 |
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| 引用本文： | 孙晗笑,利奕成,朱彦彦,钟瑛,冯丽霞.vMIP-Ⅱ肽在大肠杆菌中的双辅助子高效表达[J].暨南大学学报,2002,23(3). |
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| 作者姓名： | 孙晗笑 利奕成 朱彦彦 钟瑛 冯丽霞 |
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| 作者单位： | 暨南大学医学院基因组药物研究中心,广东,广州,510632 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，国家高技术研究发展计划(863计划)，广东省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:构建病毒趋化因子(vMIP-II)基因表达载体并在大肠杆菌中以辅助折叠和辅助阻遏方式高效表达vMIP-II重组肽. 方法:用PCR法获得vMIP-II基因片断,将其插入表达载体pQE,构建重组表达载体pEh-vMIP. 表达载体、辅助折叠子和辅助阻遏子载体共转染大肠杆菌DH5α,用酶切、DNA测序、PCR扩增鉴定阳性克隆. 结果:阳性重组子在大肠杆菌细胞中经IPTG诱导可高效表达vMIP-II重组肽,蛋白电泳分析可观察到一相对分子质量与理论值相符(约8×103)的诱导表达条带, 其表达量约占菌体总蛋白的20%. 分析表明,vMIP-II重组肽主要以可溶性形式表达. 结论:用双辅助技术在大肠杆菌中高效表达较小相对分子质量vMIP-II的成功,为进一步研究vMIP-II的功能及应用奠定基础,也为同类小分子、易降解的肽类物提供基因工程表达方法.
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| 关 键 词： | 病毒趋化因子 重组肽 辅助子 基因表达 大肠杆菌 |
High-level expression with two-help molecules of viral chemokine vMIP-Ⅱ peptide in E. coli |
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