| 均匀设计优化黑木相思ISSR-PCR体系 |
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| 引用本文： | 胡薇,陈宇,林来水,林思祖.均匀设计优化黑木相思ISSR-PCR体系[J].福建师范大学学报(自然科学版),2008,24(6). |
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| 作者姓名： | 胡薇 陈宇 林来水 林思祖 |
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| 作者单位： | 1. 福建农林大学林学院,福建,福州,350002;福建师范大学生命科学学院,福建,福州,350108
2. 福建农林大学林学院,福建,福州,350002 |
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| 摘 要： | 采用均匀设计,对影响黑木相思ISSR-PCR体系的引物、Mg2 、dNTP、Taq DNA聚合酶和模板DNA浓度等进行5因素5水平和5因素3水平两轮优化,建立了适合于黑木相思ISSR-PCR的体系:在20μL反应体系中,含引物0.30μmol.L-1,Mg2 3.00 mmol.L-1,dNTP 0.15 mmol.L-1,Taq DNA聚合酶0.75U,模板DNA 2.00 ng.μL-1.在此基础上对扩增程序中的循环次数、退火温度、退火时间进行筛选,获得的扩增程序为:94℃预变性5 min;接着进行33个循环:94℃变性35 s,52~61.5℃退火52 s,72℃延伸90 s;循环结束后,72℃延伸10 min.同时筛选得到10个扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物.
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| 关 键 词： | 黑木相思 均匀设计 ISSR-PCR |
The Uniform Design Optimization of ISSR-PCR System in Acacia melanoxylon |
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| HU Wei,CHEN Yu,LIN Lai-shui,LIN Si-zu.The Uniform Design Optimization of ISSR-PCR System in Acacia melanoxylon[J].Journal of Fujian Teachers University(Natural Science),2008,24(6). |
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| Authors: | HU Wei CHEN Yu LIN Lai-shui LIN Si-zu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Acacia melanoxylon uniform design ISSR-PCR |
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