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猫杯状病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用
作者姓名:姜雪  高玉伟  胡桂学  杨松涛  赵艳丽  刘秋燕  徐春忠  梁秀娟  夏咸柱
作者单位:1. 吉林农业大学 动物科学技术学院, 长春 130118; 2. 解放军军事医学科学院 军事兽医研究所, 长春 130062;3. 上海野生动物园, 上海 201300; 4. 吉林省野
生动物救护繁育中心, 长春 130122
基金项目:公益性行业(农业)专项基金(批准号:201303042)
摘    要:根据GenBank中编码猫杯状病毒(FCV)衣壳蛋白ORF2的保守序列, 设计并合成了一对引物和相应的TaqMan探针, 建立了快速检测FCV的荧光定量PCR
方法. 通过对该方法的反应体系和反应条件进行优化, 建立了标准曲线, 给出了特异性、 敏感性和重复性实验, 并对临床24份疑似样品(其中阳性3份、 阴性21份)进行检测.  结果表明: 该方法检测cDNA的线性关系为0.992, 线性范围为2.26×1011~2.26×101拷贝/μL; 可检测出样品中的FCV, 其他猫相关病毒检测为阴性; 批内重复性实验变异系数为2.158%, 与病毒分离结果相符.

关 键 词:猫杯状病毒(FCV)  荧光定量PCR  检测方法  
收稿时间:2012-12-03
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