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重构猪SLA-I单链复合体及其口蹄疫病毒VP1蛋白限制性表位的筛选
引用本文:高凤山,姜平,方青美,李云岗,李新生,王钦富,迟彦,夏春.重构猪SLA-I单链复合体及其口蹄疫病毒VP1蛋白限制性表位的筛选[J].自然科学进展,2007,17(6):724-730.
作者姓名:高凤山  姜平  方青美  李云岗  李新生  王钦富  迟彦  夏春
作者单位:大连大学生物工程学院生物有机化学重点实验室 大连116622(高凤山,姜平,王钦富,迟彦),中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室 北京100094(方青美,李云岗,李新生,夏春)
摘    要:目前,没有研究猪SLA-I类复合体限制性表位的系统.为了构建猪的SLA-I类复合体,研究其相应重要病毒的限制性表位,亚克隆猪主要组织相容性复合体重链基因SLA-2胞外区和轻链基因β2m成熟肽区,利用一富含甘氨酸和丝氨酸的Linker(G4S)3连接两个基因,通过SOEPCR体外构建了猪可溶性的单链复合体SC-SLA-ISLA-2-(G4S)3-β2m],计算机方法设计3类口蹄疫病毒VP1蛋白的T细胞表位,经化学合成,分别命名为PepⅠ(FMDV/VP126—34)、PepⅡ(FMDV/VP1157—165)和PepⅢ(FMDV/VP145—53),用以结合单链复合体蛋白SC-SLA-I.酸洗脱结合质谱法测定SC-SLA-I结合表位,同时设定非相关蛋白和多肽的对照试验.结果显示,Pep Ⅰ和Pep Ⅱ均能和SC-SLA-I结合,而Pep Ⅲ及非相关多肽不能结合,对照蛋白MBP的肽结合试验显示阴性.结果表明,多肽Pep Ⅰ和Pep Ⅱ属于SLA-I类限制性表位.

关 键 词:SLA-I单链复合体  T细胞表位  口蹄疫病毒
收稿时间:2006-10-24
修稿时间:2006-10-242006-12-07
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