重构猪SLA-I单链复合体及其口蹄疫病毒VP1蛋白限制性表位的筛选 |
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引用本文: | 高凤山,姜平,方青美,李云岗,李新生,王钦富,迟彦,夏春.重构猪SLA-I单链复合体及其口蹄疫病毒VP1蛋白限制性表位的筛选[J].自然科学进展,2007,17(6):724-730. |
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作者姓名: | 高凤山 姜平 方青美 李云岗 李新生 王钦富 迟彦 夏春 |
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作者单位: | 大连大学生物工程学院生物有机化学重点实验室 大连116622(高凤山,姜平,王钦富,迟彦),中国农业大学动物医学院农业部预防兽医学重点实验室 北京100094(方青美,李云岗,李新生,夏春) |
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摘 要: | 目前,没有研究猪SLA-I类复合体限制性表位的系统.为了构建猪的SLA-I类复合体,研究其相应重要病毒的限制性表位,亚克隆猪主要组织相容性复合体重链基因SLA-2胞外区和轻链基因β2m成熟肽区,利用一富含甘氨酸和丝氨酸的Linker(G4S)3连接两个基因,通过SOEPCR体外构建了猪可溶性的单链复合体SC-SLA-ISLA-2-(G4S)3-β2m],计算机方法设计3类口蹄疫病毒VP1蛋白的T细胞表位,经化学合成,分别命名为PepⅠ(FMDV/VP126—34)、PepⅡ(FMDV/VP1157—165)和PepⅢ(FMDV/VP145—53),用以结合单链复合体蛋白SC-SLA-I.酸洗脱结合质谱法测定SC-SLA-I结合表位,同时设定非相关蛋白和多肽的对照试验.结果显示,Pep Ⅰ和Pep Ⅱ均能和SC-SLA-I结合,而Pep Ⅲ及非相关多肽不能结合,对照蛋白MBP的肽结合试验显示阴性.结果表明,多肽Pep Ⅰ和Pep Ⅱ属于SLA-I类限制性表位.
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关 键 词: | SLA-I单链复合体 T细胞表位 口蹄疫病毒 |
收稿时间: | 2006-10-24 |
修稿时间: | 2006-10-242006-12-07 |
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