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Pyrococcus furiosus小分子热休克蛋白Pfu-sHSP的克隆达和纯化
引用本文:陈华友,谭小力,张志燕,褚仲梅.Pyrococcus furiosus小分子热休克蛋白Pfu-sHSP的克隆达和纯化[J].信阳师范学院学报(自然科学版),2009,22(1).
作者姓名:陈华友  谭小力  张志燕  褚仲梅
作者单位:1. 江苏大学,生命科学研究院,江苏,镇江,212013;中国科学院,上海生命科学研究院,上海,200233
2. 江苏大学,生命科学研究院,江苏,镇江,212013
3. 中国科学院,上海生命科学研究院,上海,200233
基金项目:国家重点基础研究发展规划(973计划),江苏大学校基金 
摘    要:用PCR扩增嗜高温菌Pyrococctu furiosus的小分子热休克蛋白基因后,克隆于质粒pT7473中.该小分子热休克蛋白Pfu-sHSP含有较多的稀有密码子,在大肠杆菌BL21(DE),几乎无表达,而在带有大肠杆菌稀有密码子AGA(arg)AGG(arg),AUA(ile)和CUA(leu)的BL21-Codonplus(DE)3-RIL中能大量表迭.大量表达Pfu-sHSP蛋白的细胞用超声波破碎后,离心沉淀用85℃水浴20 min,再离心,上清液再以Q Sepha-rose Fast Flow阴离子交换和S-200凝胶过滤层析进一步纯化,可以得到90%以上的蛋白.

关 键 词:小分子热休克蛋白  分子伴侣

Cloning, Expression and Purification of a Small Heat Shock Protein from Pyrococcus furiosus
CHEN Hua-you,TAN Xiao-li,ZHANG Zhi-yan,CHU Zhong-mei.Cloning, Expression and Purification of a Small Heat Shock Protein from Pyrococcus furiosus[J].Journal of Xinyang Teachers College(Natural Science Edition),2009,22(1).
Authors:CHEN Hua-you  TAN Xiao-li  ZHANG Zhi-yan  CHU Zhong-mei
Abstract:
Keywords:Pyrococcus furosus
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