水稻土壤宏基因组中的β-葡萄糖苷酶基因克隆、表达及酶活的研究 |
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引用本文: | 贺俐,吴杨.水稻土壤宏基因组中的β-葡萄糖苷酶基因克隆、表达及酶活的研究[J].井冈山大学学报(自然科学版),2014(3):42-45. |
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作者姓名: | 贺俐 吴杨 |
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作者单位: | 井冈山大学生命科学学院,江西吉安343009 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31060263):江西省自然科学基金项目(2010GQN0118,20132BAB204011);江西省教育厅科技计划项目(GJJ13543,GJJ13544) |
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摘 要: | β-葡萄糖苷酶(Ec3.2.1.21)属于糖苷水解酶家族3,它能够水解非还原性末端的β-D葡萄糖苷键,释放出游离的葡萄糖及相应的配基。β-葡萄糖苷酶是纤维素降解中的关键酶,对于可再生资源纤维素的利用具有十分重要的意义。本研究从水稻土壤中分离得到β-葡萄糖苷酶基因pds5,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,转化BL21大肠杆菌中,并诱导表达该基因。重组BL21大肠杆菌用IPTG诱导后,所提取的酶蛋白具有β-葡萄糖苷酶的活性,经SDS-PAGE分析,确定其相对分子质量为83 kD。通过控制pH和温度的方法,测得该酶酶活最适pH为7.0,最适温度为37.5℃。
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关 键 词: | β-葡萄糖苷酶 克隆 酶活 |
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