固定剂和传代次数对线粒体荧光质粒pDsRed2-Mito荧光强度的影响

采用标记线粒体的荧光质粒pDsRed2-Mito转染PC12细胞,分别以95%乙醇、甲醇、丙酮和4%多聚甲醛作为固定剂对筛选后的细胞进行固定,最后在激光共聚焦显微镜下观察不同固定剂对荧光质粒荧光强度的影响.结果表明,95%乙醇或甲醇作为固定剂固定细胞后易导致荧光猝灭,而丙酮或4%多聚甲醛固定细胞后,对质粒荧光强度没有显著影响.不同传代次数对pDsRed2-Mito质粒的荧光强度也没有显著影响.因此,在选择pDsRed2-Mito质粒标记线粒体时,不用考虑传代次数的影响,宜选择丙酮或4%多聚甲醛作为固定剂才能最大化的保持质粒的荧光强度.

Effect of Different Fixatives and Passage Number on Fluorescence Intensity of pDsRed2-Mito Plasmid