| gfp融合的甲基对硫磷水解酶基因mph在E. coli中的表达 |
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| 引用本文： | 黄灿,程杨,马立新,严红.gfp融合的甲基对硫磷水解酶基因mph在E. coli中的表达[J].湖北大学学报(自然科学版),2019,41(1). |
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| 作者姓名： | 黄灿 程杨 马立新 严红 |
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| 作者单位： | 湖北大学生命科学学院,湖北 武汉,430062;湖北大学生命科学学院,湖北 武汉,430062;湖北大学生命科学学院,湖北 武汉,430062;湖北大学生命科学学院,湖北 武汉,430062 |
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| 摘 要： | 依照大肠杆菌密码子的偏爱性将来源于Pseudomonas sp. M6的有机磷水解酶基因mph设计合成了新的有机磷水解酶基因,然后将其与GFP融合进行表达,构建一株具有全细胞催化活性的大肠杆菌工程菌.设计优化后所合成的mph-r基因全长927 bp,然后将基因克隆到p ET23a-gfp大肠杆菌表达型质粒上,成功构建了重组表达质粒p ET23a-gfpmph-r,转化大肠杆菌感受态Rosetta blue.经过诱导剂IPTG的低温诱导24 h后,收集细胞,通过SDS-PAGE和Western Blot检测融合蛋白的表达.实验结果显示,融合蛋白的表达量大大提高,且通过酶活分析测定,全细胞酶活达到了11. 2 U/m L.
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| 关 键 词： | 甲基对硫磷水解酶 GFP mph-r基因 融合蛋白 |
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