| 重组β-葡萄糖醛酸苷酶转化甘草酸的定向性改造 |
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| 引用本文： | 矫丽媛,吕波,王金娜,李春.重组β-葡萄糖醛酸苷酶转化甘草酸的定向性改造[J].石河子大学学报,2013(5):640-644. |
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| 作者姓名： | 矫丽媛 吕波 王金娜 李春 |
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| 作者单位： | [1]石河子大学化学化工学院／新疆兵团化工绿色过程重点实验室／省部共建国家重点实验室培育基地,石河子832003 [2]北京理工大学生命学院,北京100081 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（21176028） |
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| 摘 要： | 为提高重组β-葡萄糖醛酸苷酶的底物特异性，通过易错PCR方法对其进行突变并构建突变体文库，利用薄层层析和高效液相色谱对突变文库进行筛选，获得了突变株PGUS（M51）E，其底物特异性提高了41％。突变酶的酶学特性研究发现，该突变酶的最适pH值和温度较PGUS-E无显著变化，酶活力下降了16．86％，T。值提高了5℃；序列分析结果表明：PGUS（M51）-E共发生5处突变，其中3处发生在糖基结合域。因此，利用定向进化策略能有效提高伊葡萄糖醛酸苷酶的底物识别特异性。
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| 关 键 词： | β-葡萄糖醛酸苷酶 易错PCR 甘草酸 底物特异性 |
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