| 重组人血管内皮细胞生长因子的表达及活性研究 |
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| 引用本文： | 王晓华,吉琼梅,吴朝霞,董文心.重组人血管内皮细胞生长因子的表达及活性研究[J].暨南大学学报,2004,25(4):426-430. |
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| 作者姓名： | 王晓华 吉琼梅 吴朝霞 董文心 |
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| 作者单位： | 1. 广州医学院生物化学与分子生物学教研室,广东,广州,510182
2. 上海医药工业研究院药理研究室,上海,200437 |
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| 摘 要： | 目的 :用基因工程的方法在大肠杆菌中诱导表达人血管内皮生长因子 (VEGF) ,分离纯化并检测其生物学活性 ,以研究其在药学领域潜在的药用价值。方法 :利用PCR技术扩增VEGF基因片段 ,克隆到pQE30表达载体中 ,转化E .coliM15菌株后用IPTG进行诱导表达。经裂解细胞、变性、复性和Ni-NTAagarose金属螯合柱层析等方法纯化得到VEGF。用鸡胚绒毛尿囊膜 (CAM)血管生成实验检测VEGF的生物活性。结果 :重组表达质粒在大肠杆菌中成功地表达了相对分子质量为 2 0 6 0 0的融合蛋白 ,它以不溶性的包涵体形式存在 ,占菌体总蛋白的 30 %左右。经分离纯化融合蛋白SDS -PAGE显示为单一区带。CAM结果表明给药组血管生成数 (2 1 7± 3 1、39 3± 2 8)与对照组 (15 4± 1 9、2 9 2± 4 2 )相比有明显增加 (P <0 0 5 )。结论 :利用原核表达系统得到血管内皮生长因子具有天然VEGF生物学活性 ,为进一步的应用研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人血管内皮生长因子 鸡胚绒毛尿囊膜 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-9965(2004)04-0426-05 |
| 修稿时间： | 2003年12月4日 |
Expression,purification and activity assay of recombinated the vascular endothelial growth factor (VEGF) |
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| WANG Xiao-hua,JI Qiong-mei,WU Zhao-xia,DONG Wen-xin.Expression,purification and activity assay of recombinated the vascular endothelial growth factor (VEGF)[J].Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition),2004,25(4):426-430. |
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| Authors: | WANG Xiao-hua JI Qiong-mei WU Zhao-xia DONG Wen-xin |
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| Institution: | WANG Xiao-hua~1,JI Qiong-mei~1,WU Zhao-xia~1,DONG Wen-xin~2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | vascular endothelial growth factor (VEGF) chicken chorioallantoic membrane gene expression |
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