| Foxo1突变体转基因,ob/ob小鼠建立与表型分析 |
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| 引用本文： | 路万平,李浩,刘慧敏,肖传斌,杨国庆.Foxo1突变体转基因,ob/ob小鼠建立与表型分析[J].河南科学,2019,37(5):716-723. |
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| 作者姓名： | 路万平 李浩 刘慧敏 肖传斌 杨国庆 |
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| 作者单位： | 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450001;河南农业大学生命科学学院动物基因工程实验室,郑州,450001 |
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| 摘 要： | Foxo1是瘦素作用的负调控因子,实验室前期工作发现,其突变体Foxo1ΔDBD可导致转基因小鼠体重降低等表现型,本实验旨在研究转基因小鼠此表型与瘦素作用的关系.首先采用ALZET?渗透泵的方法对成年雄性的具有瘦素基因缺陷(ob/ob)小鼠进行10 d的瘦素处理,使其获得生育能力,然后采用动物杂交的方法制备双基因改造鼠,即ob/ob基因遗传背景的Foxo1ΔDBD转基因小鼠(Foxo1ΔDBD/+,ob/ob).经PCR扩增的方法进行基因型鉴定后,对双基因改造鼠的体重、体温等表型进行分析.结果显示:①植入含瘦素溶液的ALZET?渗透泵10 d后的4只雄性ob/ob小鼠全部获得了生育能力.②成功制备了46只双基因改造鼠,39只ob/ob小鼠等.③表型分析结果显示,无ob/ob遗传背景的转基因Foxo1ΔDBD小鼠(Foxo1ΔDBD/+)与野生型小鼠相比,体重显著性降低(P0.05),棕色脂肪内的UCP1转录水平显著升高(P0.05);而双基因改造鼠和ob/ob小鼠相比,体重、体温、空腹血糖和采食量均无显著性差异(P0.05),且UCP1转录水平上的表达也无显著性差异(P0.05).本实验成功制备了双基因改造鼠,并进行了表型分析,结果表明Foxo1ΔDBD转基因小鼠的体重降低和棕色脂肪UCP1转录升高等表现依赖瘦素的作用.
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| 关 键 词： | Foxo1ΔDBD/+ ob/ob 转基因小鼠 瘦素 表型分析 |
Establishment and Phenotypic Analysis of Foxo1 the Mutant Transgene,ob/ob Mice Model |
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