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| CRISPR/Cas9技术联合AAV对Rosa-mTmG小鼠的MEF细胞进行编辑 | |
| 作者姓名： | 丁楠 韩兴龙 武宏春 杨静思 王勇 赵振奥 雷伟 殷为民 胡士军 |
| 作者单位： | 1. 苏州大学医学部心血管病研究所;2. 苏州大学附属第一医院心脏大血管外科 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(81770257,81970223)；;江苏省自然科学基金(BK20170002)；;江苏省医学重点学科(实验室)(XK201118)平台资助； |
| 摘 要： | 目前,基因编辑技术已被广泛用于生物医学研究,本研究利用AAV(Adeno-Associated Virus)递送CRISPR/Cas9系统,实现高效率的基因编辑,并对特定组织细胞中的基因编辑进行了初步探索.我们首先采用Rosa-mTmG转基因小鼠来研究CRISPR/Cas9在小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblast,MEF)中的编辑效率;接着,我们构建了能够被AAV包装的SaCas9系统,并通过瞬转以及AAV介导递送的方式检测其基因编辑效率;最后,我们还构建了含有心肌特异启动子的cTNT-PX601-sgRNA以备后续研究.结果发现,与瞬转相比,AAV介导CMV-PX601-sgRNA在体外能够极大地提高细胞的基因编辑效率.另外,cTNT-PX601-sgRNA能够在心肌细胞中特异表达.我们的结果表明,利用AAV介导的CRISPR/Cas9系统在体外可以实现高效地基因编辑,为靶向修复基因缺陷疾病,特别是特定组织器官中的基因缺陷,提供了研究工具和实验依据. |
| 关 键 词： | 基因编辑 CRISPR/Cas9 腺相关病毒 小鼠胚胎成纤维细胞 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |