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利用病毒诱导的基因沉默技术研究一个豌豆PI同源基因的功能
引用本文:宋伟杰,王峥,王利琳.利用病毒诱导的基因沉默技术研究一个豌豆PI同源基因的功能[J].科学通报,2007,52(14):1644-1648.
作者姓名:宋伟杰  王峥  王利琳
作者单位:1. 杭州师范大学生命与环境科学学院,杭州,310036
2. 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所,植物分子遗传学国家重点实验室,上海,200032
基金项目:国家自然科学基金(批准号:30671059)和浙江省自然科学基金(批准号:Y304128)资助项目 感谢中国科学院上海生命科学研究院上海植物生理生态研究所植物分子遗传学国家重点实验室罗达研究员对本研究的悉心指导,王婕琛博士在RT-PCR以及杨军、晏军博士在原位杂交实验上的帮助.
摘    要:在植物发育生物学研究中, 对很多非模式植物基因功能的研究总是因为缺乏快速有效的方法而受到限制. 病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing, VIGS)技术是近年来发展起来的一种反向遗传学快速研究基因功能的方法. 本研究利用一种基于PEBV (pea early browning virus)的VIGS体系研究了豌豆PsPI基因的功能. 豌豆在其PsPI基因沉默后出现了类似于拟南芥pi突变体/金鱼草glo突变体的表型, 导致花瓣向萼片以及雄蕊向心皮转变. 半定量RT-PCR分析发现, 在VIGS-PsPI沉默植株花苞中, PsPI基因的mRNA水平显著下降. mRNA原位杂交结果显示, PsPI基因早期在起始共同原基的部位表达, 后期在花器官第二、三轮表达. 本研究结果证明了PsPI基因具有拟南芥PI/金鱼草GLO同源基因的功能, 说明这类基因在进化和功能上是相当保守的, 同时也表明VIGS是一种研究植物基因功能的快速有效的方法, 特别是对于那些转化困难的非模式植物基因功能的研究具有更为重要的意义.

关 键 词:豌豆  病毒诱导的基因沉默(VIGS)  PEBV  PsPI基因  同源异型转变
收稿时间:2007-03-25
修稿时间:2007-03-25
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