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| 人可溶性TRAIL蛋白在衣藻叶绿体中的表达 | |
| 引用本文： | 杨宗岐,李轶女,陈凤,李董,张志芳,刘彦信,郑德先,王勇,沈桂芳.人可溶性TRAIL蛋白在衣藻叶绿体中的表达[J].科学通报,2006,51(12):1400-1405. |
| 作者姓名： | 杨宗岐 李轶女 陈凤 李董 张志芳 刘彦信 郑德先 王勇 沈桂芳 |
| 作者单位： | 1. 南开大学生命科学学院,天津,300071;中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081 2. 中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081 3. 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室,北京,100005 4. 南开大学生命科学学院,天津,300071 |
| 基金项目： | 致谢 本工作为国家自然科学基金（批准号：30571189）和天津市科委基金（批准号：033605111）资助项目. |
| 摘 要： | 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)能选择性诱导多种肿瘤细胞凋亡而对正常细胞无毒性. 以衣藻叶绿体基因组的clpP-trnL-petB-chlL-rpl23-rpl2为同源重组片段, 壮观霉素抗性基因为选择标记, 构建了编码TRAIL胞外区可溶性片段(sTRAIL)的cDNA衣藻叶绿体表达载体p64TRAIL, 通过基因枪将其导入衣藻叶绿体中, 经壮观霉素抗性筛选, 获得了3个抗性衣藻转化子. 转化子经过抗性继代筛选后, 经PCR, Southern blot检测分析及暗培养, 证实sTRAIL编码区DNA已整合到衣藻叶绿体基因组中, Western blot检测分析表明, sTRAIL编码区在衣藻叶绿体中获得了表达. Western blot影像摄录分析表明, 表达的sTRAIL蛋白占衣藻细胞可溶性总蛋白的0.43%~0.67%. 实验结果证明, 用衣藻叶绿体作为生物反应器生产医药蛋白是可行的. |
| 关 键 词： | 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL) 衣藻叶绿体 叶绿体表达 同源重组 |
| 收稿时间： | 2006-02-24 |
| 修稿时间： | 2006-02-242006-05-17 |
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