腺相关病毒介导锌指核酸酶体外切除HIV-1基因组研究 |
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引用本文: | 梁智铭,杨辛毅,王亚楠,王菁,沈晓婷,潘浛雨,杨金龙,陆盼盼,赵琳,梁玥,朱焕章.腺相关病毒介导锌指核酸酶体外切除HIV-1基因组研究[J].复旦学报(自然科学版),2023(6):753-764. |
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作者姓名: | 梁智铭 杨辛毅 王亚楠 王菁 沈晓婷 潘浛雨 杨金龙 陆盼盼 赵琳 梁玥 朱焕章 |
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作者单位: | 复旦大学生命科学学院 |
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摘 要: | 人类免疫缺陷病毒1型(Human Immunodeficiency Virus type 1, HIV-1)能够整合到宿主细胞基因组并通过基因沉默的方式逃避高效抗逆转录病毒疗法(Highly Active Antietroviral Therapy, HAART),而高效特异性的基因编辑工具的出现,有望成功切除HIV-1前病毒基因组。重组腺相关病毒(AAV)是基因治疗的重要载体系统,为了获得能够高效感染T细胞的基因编辑工具递送系统,本研究通过比较过表达增强绿色荧光蛋白的血清型2、血清型6、血清型DJ的重组腺相关病毒,筛选出T细胞系的偏好血清型为6型。通过比较CMV启动子、SFFV启动子,筛选出T细胞系的偏好启动子为SFFV启动子。最后,我们通过制备过表达靶向HIV-1长末端重复序列(Long Terminal Region, LTR)的锌指核酸酶(Zinc Finger Nuclease, ZFN)的AAV6递送载体系统,感染模拟HIV-1阳性表达的细胞系Ya, T7E1检测证实HIV-1前病毒基因组被特异性切除,流式细胞仪检测证实切除效率约为17.1%,测序分析进一步证实靶向HIV-...
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关 键 词: | 基因编辑工具 人类免疫缺陷病毒1型 获得性免疫缺陷综合征 锌指核酸酶 腺相关病毒 |
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