基于小鼠肝炎病毒研究遗传工程小鼠隔离检疫设计 |
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引用本文: | 桂飞,杨伟伟,俞利平,周祥,汪海燕,孙筱品,戴方伟,宋晓明.基于小鼠肝炎病毒研究遗传工程小鼠隔离检疫设计[J].实验动物科学,2020,37(1):33-37. |
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作者姓名: | 桂飞 杨伟伟 俞利平 周祥 汪海燕 孙筱品 戴方伟 宋晓明 |
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作者单位: | 杭州师范大学实验动物中心;浙江省医学科学院实验动物中心 |
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基金项目: | 杭州市重大科技创新项目(NO.20142013A62)。 |
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摘 要: | 目的以小鼠肝炎病毒(MHV)为例,研究两种常用小鼠感染MHV后粪便中病毒核酸检测量与血清特异性抗体的变化,探讨实验动物病原微生物感染的检测设计。方法用MHV病毒核酸检测阳性的脏垫料持续饲养C57BL/6和BALB/c小鼠(n=20)28 d,进行脏垫料接触感染。之后所有小鼠使用无菌垫料进行单笼饲养,每周收集新鲜粪便和血清样本,经Taqman荧光定量PCR(qPCR)和ELISA法检测后进行统计分析。结果对于BALB/c小鼠,采用qPCR法检测时,在实验第21天即有阳性检出(阳性率20%),第28天阳性检出率达到最高,为80%,第42天阳性检出率为50%,至第56天无阳性检出。血清ELISA检测发现,实验第42天才有MHV特异性抗体检出(阳性率为50%)。对于C57BL/6小鼠,采用qPCR法检测时,在第28天和第42天分别从20%小鼠粪便中检出MHV。而采用ELISA法在整个实验期均未检出特异性阳性抗体。结论在隔离检疫和常规病原检测中,建议选用BALB/c小鼠作为哨兵鼠,替代C57BL/6小鼠。由于qPCR法具有早检出和更高检出率的优点,建议在隔离检疫早期采用基于分子生物学的粪样核酸检测法替代ELISA法。
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关 键 词: | 小鼠肝炎病毒 隔离检疫 哨兵鼠 检测 |
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