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醋酸菌辅酶Q_(10)的RP-HPLC测定方法及提取工艺优化
摘    要:建立了一种测定辅酶Q_(10)(CoQ_(10))含量的反相高效液相色谱方法(RP-HPLC)并优化了其提取工艺。色谱测定使用Diamonsil反相C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇与乙醇的体积比为20∶80,检测波长275 nm,柱温35℃,进样体积20μL,流速1.0 mL/min。在此条件下,CoQ_(10)在1~100μg/mL质量浓度范围内的线性关系良好(R~2=0.999 2),平均回收率为97.07%,相对标准偏差(RSD)为2.93%,可很好地应用于醋酸菌CoQ_(10)含量的测定。在单因素实验的基础上,采用响应面分析法,建立了巴氏醋杆菌中CoQ_(10)酸热法提取的二次多项式回归方程,确定了CoQ_(10)的最优提取工艺:热处理温度为91℃,HCl溶液物质的量浓度为0.08 mol/L,热处理时间为38 min。采用该工艺提取的巴氏醋杆菌样品中CoQ_(10)的质量分数为114.81μg/g,与理论值115.66μg/g相近,相同样品的CoQ_(10)提取值为优化前的368.83%,说明优化后的提取工艺可以有效提取醋酸菌中CoQ_(10)。

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